等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是一種非常有用的生物物理技術，它通過測量熱量的變化來研究分子之間的相互作用。ITC可以直接測定結合反應的熱力學參數(shù)，如結合常數(shù)(Kd)、焓變(ΔH)、熵變(ΔS)和吉布斯自由能變(ΔG)，從而幫助理解分子間的相互作用機制。

　　ITC的工作原理：

　　實驗設置：ITC實驗通常在一個絕熱環(huán)境中進行，其中樣品池(Sample Cell)包含一個固定體積的溶液，而滴定劑(Titrant)則儲存在一個注射器中。

　　溫度控制：實驗在整個過程中維持恒定溫度。

　　滴定過程：滴定劑被逐步加入到樣品池中，每次加入都會導致溫度變化，這反映了反應的放熱或吸熱情況。

　　數(shù)據(jù)記錄：儀器會自動記錄每次滴定后樣品池中的溫度變化，并根據(jù)溫度變化計算出熱量變化。

　　數(shù)據(jù)分析：通過分析滴定曲線(即滴定體積與釋放熱量的關系圖)，可以得到相互作用的熱力學參數(shù)。

　　ITC的應用領域：

　　蛋白質-配體相互作用：例如藥物分子與蛋白質靶點的結合研究。

　　蛋白質-蛋白質相互作用：了解蛋白質復合體的組裝和解離。

　　核酸-蛋白質相互作用：研究轉錄因子與DNA的結合特性。

　　小分子間相互作用：例如脂質、糖類或其他小分子與蛋白質的相互作用。

　　ITC的局限性：

　　樣品要求：需要足夠純度的樣品，并且濃度適中。

　　實驗時間：一次完整的ITC實驗可能需要幾個小時才能完成。

　　ITC的優(yōu)點：

　　直接測量：無需標記任何反應組分，直接從熱量變化推導出結合參數(shù)。

　　高靈敏度：可以檢測微摩爾至納摩爾級別的結合事件。

　　廣泛的適用范圍：適用于多種類型的分子和不同的結合模式。