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外泌體表征與鑒定的主要方法

更新時間:2025-02-21 點擊次數:0 所屬欄目:行業(yè)信息

  1. 形態(tài)學表征

  透射電子顯微鏡(TEM)

  TEM可以直觀觀察外泌體的形態(tài)和超微結構,如雙層膜特征。其分辨率可達1納米,適合用于外泌體的形態(tài)學鑒定。

  優(yōu)點:高分辨率,可直接觀察外泌體結構。

  缺點:樣品制備復雜,無法定量分析外泌體濃度。

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  冷凍電鏡(Cryo-TEM)

  冷凍電鏡通過快速冷凍技術保留外泌體的天然狀態(tài),適合觀察含水樣品和敏感樣品,能提供更接近原始狀態(tài)的結構信息。

  2. 粒徑與濃度分析

  納米顆粒跟蹤分析(NTA)

  NTA通過激光照射和布朗運動分析外泌體的粒徑分布和濃度,適用于30-1000納米范圍內的顆粒檢測。

  優(yōu)點:快速、實時、可定量。

  缺點:可能將外泌體表面的水膜計入,導致粒徑偏大2。

  動態(tài)光散射(DLS)

  DLS通過光散射測量顆粒粒徑,適合單分散性樣品,但對復雜樣品的分辨率較低。

  3. 蛋白質標志物檢測

  Western Blot(WB)

  WB用于檢測外泌體特異性蛋白標志物,如CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix和HSP70等。這些標志物與外泌體的形成和分泌過程密切相關1312。

  優(yōu)點:特異性高,技術成熟。

  缺點:無法全面分析外泌體成分,且不同細胞來源的外泌體標志物可能不同。

  ELISA

  ELISA可用于定量檢測外泌體表面標志物,適合高通量篩選,但只能分析個別標志物。

  4. 分子成分分析

  質譜分析(MS)

  質譜可用于鑒定外泌體中的蛋白質、RNA和脂質等分子成分,提供全面的分子信息。

  優(yōu)點:高靈敏度,可定量分析。

  缺點:設備昂貴,操作復雜。

  RNA測序

  用于分析外泌體攜帶的RNA(如miRNA、mRNA),揭示其功能機制。

  5. 流式細胞術(FCM)

  流式細胞術通過熒光標記抗體檢測外泌體表面標志物,適合高通量分析,但分辨率較低,無法檢測小于100納米的顆粒。

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