等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是一種用于研究分子間相互作用的熱力學(xué)分析方法。它通過測量反應(yīng)過程中釋放或吸收的熱量，提供結(jié)合常數(shù)(K)、焓變(ΔH)、熵變(ΔS)和化學(xué)計(jì)量數(shù)(n)等熱力學(xué)參數(shù)。ITC廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物研發(fā)、材料科學(xué)等領(lǐng)域，用于研究蛋白質(zhì)-配體、DNA-藥物、酶-底物等分子間的相互作用。

　　ITC的核心是測量在恒溫條件下，將一種反應(yīng)物(滴定劑)逐步加入另一種反應(yīng)物(樣品)時(shí)產(chǎn)生的熱量變化。儀器通過高靈敏度的熱敏元件檢測微小的溫度變化，并將其轉(zhuǎn)化為熱量信號。

　　實(shí)驗(yàn)過程：

　　樣品池：裝入待測樣品(如蛋白質(zhì)、DNA等)。

　　滴定劑：裝入與樣品相互作用的分子(如配體、藥物等)。

　　滴定：將滴定劑逐步加入樣品池，記錄每次加入后的熱量變化。

　　數(shù)據(jù)分析：通過擬合熱量變化曲線，計(jì)算熱力學(xué)參數(shù)。

　　ITC的數(shù)據(jù)分析

　　ITC實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)是熱量隨滴定劑加入量的變化曲線(熱譜圖)。通過擬合熱譜圖，可以獲得以下參數(shù)：

　　結(jié)合常數(shù)(K)：反映分子間相互作用的強(qiáng)度。

　　焓變(ΔH)：反映反應(yīng)過程中的熱量變化。

　　熵變(ΔS)：反映反應(yīng)過程中系統(tǒng)的無序度變化。

　　化學(xué)計(jì)量數(shù)(n)：反映結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)量。

　　擬合模型：

　　單一位點(diǎn)模型：適用于簡單的1:1結(jié)合反應(yīng)。

　　多位點(diǎn)模型：適用于多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的復(fù)雜反應(yīng)。