血漿外泌體粒徑分析是研究外泌體的重要步驟之一，因為外泌體的大小不僅影響其生物分布和功能，還在一定程度上反映了外泌體的純度和分離質(zhì)量。下面是常用的血漿外泌體粒徑分析方法：

　　1. 動態(tài)光散射(Dynamic Light Scattering, DLS)

　　原理：DLS技術(shù)基于溶液中粒子在液體介質(zhì)中的布朗運動，通過測量散射光強度隨時間的變化來確定粒子的擴散系數(shù)，進而計算出粒子的粒徑。

　　特點：適合快速測定外泌體的平均粒徑及其分布寬度;可以處理少量樣品，并且不需要復雜的樣品準備過程。

　　2. 納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)

　　原理：NTA利用激光散射顯微鏡追蹤單個納米顆粒在液體中的布朗運動軌跡，根據(jù)顆粒的移動速度來估計其粒徑。

　　特點：能夠提供詳細的粒徑分布圖譜，對于復雜樣本如血漿中外泌體的檢測尤其有用;不僅可以給出平均粒徑，還能顯示不同尺寸顆粒的數(shù)量分布。

　　3. 透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscopy, TEM)

　　原理：TEM通過電子束穿透超薄切片或懸浮液滴上的顆粒，在屏幕上形成圖像，從而直接觀察到外泌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)及粒徑大小。

　　特點：分辨率極高，可以直接觀察到納米級別的結(jié)構(gòu)細節(jié);但需要對樣品進行固定、脫水等處理，且操作較為復雜。

　　4. 阻抗計數(shù)與粒度分析(Resistive Pulse Sensing, RPS)

　　原理：當顆粒通過微孔時會引起電阻變化，根據(jù)這種變化可以精確測量每個顆粒的體積，進而得出粒徑信息。

　　特點：適用于高濃度樣品的分析，具有較高的準確性和重復性;但是設(shè)備成本較高。

　　樣品準備注意事項

　　去除大分子干擾：血漿中含有大量的蛋白質(zhì)和其他大分子物質(zhì)，可能會影響粒徑分析結(jié)果，因此通常需要先對外泌體進行純化(例如通過超速離心、過濾、免疫親和捕獲等方法)。

　　保持外泌體完整性：在制備樣品過程中應(yīng)避免使用過高離心力或劇烈攪拌，以免破壞外泌體結(jié)構(gòu)。