HE染色中細(xì)胞核不著色是病理制片中的常見問題，可能由多種因素導(dǎo)致。下面是綜合原因分析及解決方案：

　　一、主要原因及對應(yīng)處理措施

　　?固定不充分?

　　?表現(xiàn)?：組織自溶或固定液滲透不足，導(dǎo)致核染色質(zhì)降解。

　　?解決?：使用4%中性甲醛(固定液體積≥組織4倍)，大組織需分割固定?。

　　?脫蠟不徹底?

　　?表現(xiàn)?：切片殘留石蠟或二甲苯，形成白色點(diǎn)狀不著色區(qū)。

　　?解決?：

　　提高烤片溫度(60-65℃)或延長烤片時間(≥30分鐘)?。

　　更換新鮮二甲苯，延長脫蠟時間(每缸≥5分鐘)?。

　　?蘇木精染液問題?

　　?表現(xiàn)?：核染色淺淡或棕色(氧化過度/不足)。

　　?解決?：

　　檢查染液pH(理想值3.5-4.0)，室溫<20℃時需加熱或延長染色時間?。

　　定期更換染液(建議每2周)，使用前過濾去除金屬雜質(zhì)?。

　　?分化/藍(lán)化不當(dāng)?

　　?表現(xiàn)?：核染色過淺或灰黑色。

　　?解決?：

　　分化時間控制在10-30秒，流水沖洗后藍(lán)化(稀氨水或0.2%碳酸氫鈉)?。

　　二、操作優(yōu)化建議

　　?預(yù)實(shí)驗(yàn)?：通過鏡檢控制染色時間(蘇木精1-3分鐘，分化適度)?。

　　?質(zhì)量控制?：

　　每日過濾蘇木精染液，避免金屬膜附著?。

　　梯度脫水(低濃度乙醇停留時間短，高濃度延長)?。

　　三、特殊組織處理

　　?淋巴結(jié)等密集組織?：固定后可用無水乙醇-乙醚混合液處理5-10分鐘，再補(bǔ)充媒染(3%硫酸鐵銨)?。

　　?小活檢組織?：固定前避免干枯，固定后充分脫水透明?