1. 熒光探針法

　　JC-1(常用探針)：

　　原理：高ΔΨm時(shí)形成紅色J聚集體(Ex/Em=585/590 nm)，低ΔΨm時(shí)呈綠色單體(Ex/Em=514/529 nm)。

　　步驟：

　　細(xì)胞加載JC-1(2.5 μM，37℃孵育20分鐘)。

　　流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡檢測(cè)紅綠熒光比值(紅/綠↓表示ΔΨm下降)。

　　優(yōu)勢(shì)：比值法減少細(xì)胞數(shù)量與探針負(fù)載量干擾。

　　TMRM/TMRE(電位依賴性探針)：

　　原理：ΔΨm越高，探針在線粒體基質(zhì)內(nèi)積累越多(熒光強(qiáng)度↑)。

　　注意事項(xiàng)：需避免光漂白，建議使用低濃度(50-100 nM)與共聚焦實(shí)時(shí)成像。

　　2. 電化學(xué)檢測(cè)法

　　氧電極法：通過(guò)耗氧率間接反映ΔΨm(需聯(lián)合ATP合酶抑制劑)。

　　膜片鉗技術(shù)：直接測(cè)量線粒體膜電位(適用于分離線粒體，技術(shù)難度高)。